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2023-09-16 11:11  浏览:37
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分离纯化价格——广州联方实验器材有限公司是集技术、科研、生产、服务和销售于一体的科学技术企业。

在有关色谱基本理论的讨论中可以得知,发生在色谱柱中总的谱带展宽效应与流动相的线速度、粒径以及溶质在流动相中的扩散系数、溶质在固定相中的扩散系数等密切相关。对于给定粒径的填料来说,能否填充成均匀而紧密的柱床,是得到高i性能柱子的关键,而采用粒径细且分布均匀的优i质填料,则是得到高i性能柱子的基本保证。

高压匀浆法装填

将填料悬浮在适宜的匀浆液中制成匀浆,在其尚未沉降之前,很快以高压泵将其以很高 的流速压进柱中,便可制备出填充均匀的柱子。这是常见的分析和制备色谱柱的装填方法。

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实验和理论研究均指出,以上述下流式匀浆法难以填装成长柱子,其原因是,随着已填充柱床的,对流体的阻力亦逐渐增加,使在一定压力下通过柱床的流速降低,亦即柱床的增长速度变慢,在这一过程中,填料颗粒的沉降亦在进行,导致所填充柱床的紧密性和均匀性降低。为保证达到一定柱效,一次填充的单柱长度不宜过大。有文献指出,使用6mm内径的柱子,5μm粒径填料,适宜的单柱柱长为10-15cm。但是近年来,φ4.6×250mm的预装柱已被认为是标准柱型,在这样的柱子上,多能获得≥80000片/m理论塔板的柱效。

为制取更长的柱子,可以使用上行法(。曾有报道,使用3μm 填料,以上行法可以制备长达1m 的柱子,且其柱效与短柱子相类似。上行法中使用的匀浆液浓度比下行法要小一些,速度也慢一些,因此所填充的柱床相对较均匀。近年来,由于微柱色谱和毛细管电色谱的发展,需要填微色谱柱乃至毛细管色谱柱,而上行法则可以用作为微柱的填充方法之一。

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对于粒径较大的填料(多用于制备色谱),如粒径≥20μm的填料,可以用干法装填,其基本方法与填装气相色谱柱类似。但需注意的一点是,在干法填装制备液相色谱柱时,不要过分剧烈地振动和敲打。振动和敲打会使填料因自身粒径的不均匀性而产生柱子整体上的不均一性,即较大的填料粒子靠近柱壁,而较细粒径者则倾向集中于柱中心。这种柱内颗粒分布的不均匀性,会导致柱效的降低。比较好的方法是采用小量多次的方法向柱内加入填料,例如每次加入相当于3-5mm柱床的填料,装一点即在实验台或桌面上垂直地轻轻磕几十下,续加一些填料后,重复上述操作,直至填装完成。

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